کروماتوگرافی ساده انجام دهید

ویدیو: روش کار با دستگا اسپکتروفتومتر در آزمایشگاه صنایع غذایی

محتوا

گام برداشتن
قسمت 1 از 3: ایجاد یک نمونه
قسمت 2 از 3: افزودن یک حلال
قسمت 3 از 3: مشاهده لاستیک ها
نکات
هشدارها
ضروریات

مخلوط ها از دو یا چند جز تشکیل شده اند که خصوصیات مختلفی دارند. روشهای زیادی برای جداسازی مخلوطها به اجزای اصلی آنها وجود دارد. برای مایعات ، این روش ها را کروماتوگرافی می نامند. در کروماتوگرافی ، مخلوطی بر اساس توانایی نسبی آنها برای حرکت در فاز ثابت (فاز جامد) با استفاده از فاز متحرک به اجزای آن جدا می شود. برخی از اجزای مخلوط به راحتی عبور می کنند ، در حالی که برخی دیگر مهار می شوند. این تضمین می کند که مخلوط به باند از اجزای مختلف جدا می شود.

گام برداشتن

قسمت 1 از 3: ایجاد یک نمونه

یک نوار کروماتوگرافی بسازید یا بخرید. نوار کروماتوگرافی نواری از مواد است که از طریق آن مخلوط فاز متحرک (یک مایع یا گاز) حرکت می کند. نوار به عنوان فاز ساکن عمل می کند ، بنابراین می توانید سرعت حرکت اجزای مختلف را در فاز متحرک مشاهده کنید. برای دستیابی به نتایج عالی می توانید نوارهای کروماتوگرافی فرموله شده خاصی خریداری کنید ، اما می توانید نوع خود را برای کروماتوگرافی اساسی ایجاد کنید. فیلتر قهوه را به صورت نوارهای مستقیم به عرض 2-3 سانتی متر و طول 5-6 سانتی متر برش دهید.
- به جای فیلتر قهوه ، می توانید از حوله های کاغذی یا هر کاغذ دیگری نیز استفاده کنید.
یک خط رنگی در پایین نوار قرار دهید. از قسمت پایین نوار حدود 2-3 سانتی متر اندازه بگیرید. در این آزمایش ، شما اجزا را با یک برجسته جدا می کنید. از یک هایلایتر مشکی برای کشیدن یک خط مستقیم از عرض نوار استفاده کنید. اطمینان حاصل کنید که خط به اندازه کافی بلند است تا بتوانید پایین کاغذ را غوطه ور کنید و خط را غوطه ور نکنید.
- به جای خط ، بعضی از افراد از پریود استفاده می کنند. این نیز کار خواهد کرد ، اما باندها با این روش به وضوح مشخص نخواهند شد.
نوار کروماتوگرافی را به صورت عمودی برطرف کنید. نوار را با استفاده از گیره های لباس به صورت عمودی محکم کنید تا بعداً مجبور نشوید آن را درون آب قرار دهید. باید آویزان شود تا طرف دارای خط علامت گذاری به زمین نزدیک شود. اطمینان حاصل کنید که گیره لباس تا آنجا که ممکن است روی نوار قرار گرفته باشد ، در حالی که هنوز آن را ایمن نگه دارید. اگر گیره روی نوار خیلی دور باشد ، می تواند بندها را تحت تأثیر قرار دهد.
- می توانید نوار را با گیره های کاغذی ، نوار یا هر روش مناسب دیگری آویزان کنید.

قسمت 2 از 3: افزودن یک حلال

آب را در یک فنجان بریزید. در کروماتوگرافی ساده ، حلال شما (مایعی که فاز متحرک را از طریق فاز ساکن حمل می کند) آب است. کمی آب به یک فنجان یا لیوان شفاف اضافه کنید. شما فقط به مقدار کافی برای خیس کردن نوار کروماتوگرافی نیاز دارید ، بنابراین چند دسی لیتر کافی است.
نوار کروماتوگرافی را در آب پایین بیاورید. نوار کروماتوگرافی را به صورت عمودی نگه دارید و آن را در آب پایین بیاورید. مطمئن شوید که چیزی را برای نگه داشتن نوار در آنجا ساخته اید زیرا این فرآیند می تواند زمان زیادی را صرف کند. پایین نوار باید غوطه ور شود ، اما خط نشانگر نباید غوطه ور شود. اگر به طور تصادفی این خط را غرق کردید ، نوار را دور بریزید و یک خط دیگر درست کنید.
- نمونه ای از ساخت و ساز برای گذاشتن گیره لباس نگهدارنده نوار به مداد بالای شیشه. به این ترتیب نوار آویزان می شود و به سختی آب را لمس می کند.
لطفا صبورانه صبر کنید همانطور که آب توسط نوار جذب می شود ، ترکیبات مختلف موجود در پست را حمل می کند. پارچه های سبک (کوچکتر) سریعتر حرکت می کنند و پارچه های سنگین (بزرگتر) آهسته تر حرکت می کنند. این ترکیب ها را بر اساس اندازه آنها به "باند" جدا می کند. با این حال ، این یک روند کند است. نوار را تماشا کنید تا ببینید که آب از قسمت بالای نوار حدود 2-3 سانتی متر فاصله دارد.
- مدت زمانی که طول می کشد تا آب از بالای نوار تا 2-3 سانتی متر طول بکشد بستگی به نوع نواری دارد که استفاده می کنید.
- پس از غوطه ور شدن نوار ، سیستم را نپوشید - از هر نوع تحریک که با پخش شدن لاستیک در نتیجه تأثیر می گذارد ، خودداری کنید.

قسمت 3 از 3: مشاهده لاستیک ها

نوار را از آب خارج کنید. آن را روی سطح صاف قرار دهید و صبر کنید تا خشک شود.
باندهای قابل مشاهده را بشمارید. هنگامی که نوار را از آب بیرون آوردید ، نوارها باید در جای خود باقی بمانند. به این ترتیب می توانید تعداد تایرهای مختلفی را که روی نوار شما دیده می شوند ، حساب کنید. این به شما ایده تقریبی می دهد که چند ترکیب مختلف در جوهر مارکر وجود دارد.
به رنگ هر باند توجه کنید. جوهر سیاه مارکر از رنگدانه های مختلف تشکیل شده است. این رنگدانه ها همه دارای رنگهای منحصر به فرد خود هستند. وقتی آنها را به باند جدا می کنید ، نوارها رنگ آن رنگدانه فردی هستند. با توجه به رنگ هر باند ، می توانید تجزیه و تحلیل کنید که کدام رنگ ها رنگدانه های جوهر سیاه موجود در مارکر هستند.
نوارها را از بالای نوار به پایین لیست کنید. نوارهای رنگی را با توجه به مسافتی که پیموده اند ، یادداشت کنید. باندهای موجود در بالا ، سبک ترین اتصالات و نوارهای پایین ، سخت ترین اتصالات شما هستند. همچنین احتمالاً متوجه روند رنگی از بالا به پایین خواهید شد. رنگ های روشن تر ، مفاصل کوچکتر هستند ، بنابراین از نوار به سمت بالا حرکت کنید - رنگ های تیره بیشتر به قسمت پایین می چسبند ، زیرا به طور کلی اتصالات سنگین تر هستند.
- نسبت فاصله یک ترکیب (Dc) به فاصله جابجا شده حلال (Ds) را مقدار Rf می نامند. می توانید مقدار Rf را برای هر تایر با تقسیم مسیری که تایر از مبدا طی کرده و مسافتی که حلال از مبدأ طی کرده را محاسبه کنید.
- به عنوان مثال ، اگر یک باند دارید که 2 سانتی متر بالاتر از مبدا و حلال 5 سانتی متر بالاتر از حلال است ، می توانید از معادله D استفاده کنید_باند/ D_حلال = از Rf استفاده کنید. در این مثال به این معنی است:
  - Rf = 2 سانتی متر / 5 سانتی متر
  - Rf = 0.4

نکات

اگر می خواهید این کار را علمی تر انجام دهید ، در واقع می توانید کاغذ کروماتوگرافی بخرید ، که شبیه فیلتر قهوه است ، اما در صورت استفاده صحیح ، یک باند رنگ تار و واضح تر ایجاد می کند. این از طریق تامین کنندگان مختلف تجهیزات آزمایشگاهی در دسترس است.
نشانگرهای رنگی مختلف را امتحان کنید ، توجه داشته باشید کدام یک از آنها به بالا می رسد ، که باعث ایجاد زیباترین گروه های رنگدانه می شود و غیره.
به دلایل مختلف از کروماتوگرافی در آزمایشگاه های واقعی علمی استفاده می شود و می تواند کاملاً پیچیده باشد. کروماتوگرافی شامل طیف گسترده ای از آزمایشات علمی است و به این روش محدود نمی شود.
قبل از انجام هر کاری مطمئن شوید که نشانگر در آب محلول است. نشانگر دائمی معمولاً برای این آزمایش کار نمی کند.
چرا این کار می کند؟ رنگدانه های رنگی مختلف در سطح مولکولی اشکال مختلفی دارند و به دلیل تفاوت در میل نسبی اجزا با فاز متحرک و ثابت ، در کاغذ متفاوت ترسیم می شوند. این از لحاظ فنی به عنوان ضریب توزیع یا ضریب پارتیشن نیز شناخته می شود. این یک نوار طولانی از رنگدانه ها است که به صورت صف آرایی قرار می گیرند ، و شبیه ترین رنگ ها به یکدیگر نزدیک هستند.